高效液相親和色譜柱TSKgel® FcR-IIIA-NPR

1. 分離原理

抗體藥物在進(jìn)入人體后自動(dòng)識(shí)別抗原，與免疫細(xì)胞表面的Fc受體結(jié)合，從而發(fā)揮藥效，攻襲并殺死癌細(xì)胞。

近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，抗體Fc區(qū)的N-糖鏈結(jié)構(gòu)會(huì)影響抗體與Fc受體之間的親和力。與Fc受體親和力強(qiáng)的抗體，其細(xì)胞殺傷力（ADCC活性）也越高，可以增強(qiáng)抗癌藥物的活性。

 根據(jù)這一機(jī)制原理，東曹公司將Fc受體之一的重組人FcγIIIA作為配基，鍵合到非多孔親水性聚合物基質(zhì)的填料上，并充填至PEEK色譜柱內(nèi)，開發(fā)出了TSKgel FcR-IIIA-NPR色譜柱。該色譜柱可以識(shí)別抗體Fc段的糖鏈結(jié)構(gòu)（是否有半乳糖基及其數(shù)量），并基于與FcγIIIA之間的親和力程度實(shí)現(xiàn)抗體分離。

2. 應(yīng)用范圍

目前為止，傳統(tǒng)的抗體活性檢測(cè)方法主要有細(xì)胞ELISA法或SPR等手段，不僅需要昂貴的設(shè)備及繁瑣的操作，且實(shí)驗(yàn)成本高耗時(shí)較長(zhǎng)。使用TSKgel FcR-IIIA-NPR色譜柱就可以非常簡(jiǎn)便地獲得重復(fù)性良好的分析結(jié)果，且分析成本更低。

此外，該色譜柱還能應(yīng)用在研發(fā)前期細(xì)胞株的篩查、細(xì)胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化、以及對(duì)培養(yǎng)過程的質(zhì)量監(jiān)控等環(huán)節(jié)。

3. 分離實(shí)例

對(duì)治療性抗體藥物A進(jìn)行分離后獲得3個(gè)組分峰，并在制備性型FcγRIIIA親和色譜柱上對(duì)3個(gè)組分峰進(jìn)行了收集、糖鏈結(jié)構(gòu)鑒定和ADCC活性測(cè)定（見下圖）。

結(jié)果表明，該色譜柱能夠基于抗體藥物Fc區(qū)糖鏈結(jié)構(gòu)的差異，實(shí)現(xiàn)ADCC活性不同的組分分離。糖鏈末端是否含有半乳糖對(duì)抗體組分的親和保留能力有很大影響，保留越強(qiáng)的組分，ADCC活性也越高。

高效液相親和色譜柱TSKgel® FcR-IIIA-NPR 北京綠百草科技發(fā)展有限公司成立于1999年，坐落于北京市昌平區(qū)企業(yè)墅上區(qū)，是一家專業(yè)經(jīng)營(yíng)純化填料、色譜柱、化學(xué)試劑和實(shí)驗(yàn)室設(shè)備及相關(guān)技術(shù)服務(wù)的科技型企業(yè)，產(chǎn)品主要應(yīng)用于制藥、生物、食品、環(huán)境和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。憑借較好的產(chǎn)品和服務(wù)，綠百草科技與廣大客戶建立了長(zhǎng)期穩(wěn)定的戰(zhàn)略合作關(guān)系，被眾多企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)認(rèn)定為“供應(yīng)商"，得到了政府部門的關(guān)懷和有力支持。

    經(jīng)過十多年的快速發(fā)展，綠百草科技創(chuàng)建了產(chǎn)品種類齊全、技術(shù)服務(wù)的色譜耗材平臺(tái)。綠百草科技被眾多國(guó)際供應(yīng)商選擇為他們?cè)谥袊?guó)區(qū)的代理，包括美國(guó)Restek公司、美國(guó)Zymo Research生物科技公司、日本三菱化學(xué)株式會(huì)社、加拿大SiliCycle股份有限公司、日本GL Sciences株式會(huì)社、美國(guó)Benson聚合物股份有限公司、日本東洋曹達(dá)株式會(huì)社、日本大賽璐化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社、日本Nacalai Tesque株式會(huì)社、日本信和化工株式會(huì)社、日本住化分析株式會(huì)社等。同時(shí)，還提供美國(guó)USP標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、歐洲藥典標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)EDQM、英國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)LGC標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、加拿大TRC標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等。目前，綠百草科技已成為國(guó)內(nèi)制藥、生物、食品、環(huán)境和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的較大供應(yīng)商之一。