寬PH色譜柱是一款耐溶劑型手性柱,硅膠表面共價(jià)鍵合有直鏈淀粉-三。具有很好溶劑耐受性,所有適用于HPLC的溶劑均可作為流動(dòng)相或者樣品溶媒使用。因此它可以用于各種分析條件,不必?fù)?dān)心因溶劑使用不當(dāng)而造成的劣化或者損壞。同時(shí)也進(jìn)一步擴(kuò)大了分離條件的選擇范圍,能夠分離更多的手性化合物。
1.避免過高的柱壓
雖然寬PH色譜柱能耐受的壓力可達(dá)6000psi(磅/平方英寸),但過高及過大的壓力變化均會(huì)縮短色譜柱的壽命,避免的方法是:
(1)柱壓過高時(shí),盡可能采用較小的流速,以不超過柱最大允許壓力的一半為宜。
(2)當(dāng)流速較大時(shí),應(yīng)采取流速梯度的辦法使流速分步到位。
(3)使用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí),進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則
超過20%的壓力沖擊會(huì)很快使柱報(bào)廢。當(dāng)使用多柱聯(lián)用時(shí),柱切換要避免在高壓下進(jìn)行。
2.注意溫度和酸堿度
一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱最高使用溫度不超過60℃,以低于40℃為宜,特別是在流動(dòng)相pH接近使用限度時(shí),更應(yīng)降低使用溫度。溫度過高會(huì)加快鍵合相的水解和硅膠的溶解,從而,使填料性質(zhì)改變,柱床塌陷,降低柱效,改變峰形。如必須要在特別的pH條件下使用寬PH色譜柱時(shí),可通過以下方法避免柱損害:
(1)在泵和進(jìn)樣閥之間加裝預(yù)柱(飽和柱)來飽和流動(dòng)相;
(2)降低使用溫度;
(3)檢驗(yàn)完畢后立即用與所使用的流動(dòng)相互相混溶的“溫和溶劑”*清洗。