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2019 12-25

液相色譜柱的分類

液相色譜柱的分類：(按色譜固定相基質(zhì)分)一.硅膠基質(zhì)：1.反相色譜柱：反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ)，表面鍵合有極性相對較弱的官能團(tuán)的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強(qiáng)，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合先被沖出，而極性弱的組份會在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。2.正相色譜：正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)，以及其他具有極性官能團(tuán)，如胺基團(tuán)(N...
2019 12-21

液相色譜柱的應(yīng)用及特點(diǎn)

液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。在選擇色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等，1.樣品是極性的且弱酸性的；就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱2.如果樣品極性太強(qiáng)，或酸性太強(qiáng)；可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC(親水色譜)，也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對試劑平衡時(shí)間長，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)，另外離子...
2019 12-17

HPLC色譜柱管理及保養(yǎng)

色譜柱的管理制定色譜柱管理的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程并嚴(yán)格執(zhí)行。每一根新購進(jìn)的色譜柱必須造冊登記,內(nèi)容包括:生產(chǎn)公司、品名、型號、規(guī)格、購進(jìn)時(shí)間、啟用時(shí)間、單價(jià)、柱內(nèi)保護(hù)溶液等。色譜柱分類存放,硅膠柱、化學(xué)鍵合硅膠柱、氰基或氨基柱、離子交換樹脂柱、凝膠柱各用一個(gè)色譜柱盒,盒上貼上標(biāo)簽,注明類別。隨柱說明書裝入密實(shí)袋附在登記本上。每啟用一根色譜柱,在色譜柱上貼上標(biāo)簽,注明啟用日期。每根柱子每兩個(gè)月保養(yǎng)一次,特別是對于一些使用頻率少的柱子,因?yàn)榉胖脮r(shí)間長,容易干柱,每一次做好保養(yǎng)記錄。對于確...
2019 12-7

液相色譜柱的系統(tǒng)結(jié)構(gòu)分析和維護(hù)方法

液相色譜柱的系統(tǒng)結(jié)構(gòu)分析和維護(hù)方法液相色譜柱進(jìn)樣系統(tǒng)：一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作，進(jìn)樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。液相色譜柱輸液系統(tǒng)：該系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強(qiáng)為l.47～4.4X107Pa，流速可調(diào)且穩(wěn)定，當(dāng)高壓流動相通過層析柱時(shí)，可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng)，可加快其在柱中的移動速度，這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存錯和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變，...
2019 11-26

C18色譜柱的選用、保養(yǎng)與維修

據(jù)統(tǒng)計(jì)，近80%的有機(jī)物及無機(jī)物可以用液相色譜法進(jìn)行分離，其中反相色譜中的C18色譜柱是液相色譜中為常用的一類色譜柱。下面就C18色譜柱的選用、保養(yǎng)與維修作一介紹。1選用C18的選用主要考慮2個(gè)問題，即柱填料和柱規(guī)格對色譜柱的影響。1.1C18柱的填料對色譜柱的影響柱填料的物理性能對填料色譜行為有重要影響。填料主要的物理性能包括如下：顆粒度、孔徑、孔體積、鍵合相化學(xué)、含碳量及烷基化處理。(1)顆粒度是指柱填料的顆粒直徑的大小。實(shí)際上色譜柱上所標(biāo)的粒徑是一個(gè)平均值。如粒徑“5μ...
2019 11-23

色譜類型分析

色譜是一種技術(shù)，通過該技術(shù)，樣品中的組分載入液相或氣相中，通過在固定相上由吸附—解吸附來完成。一、液相色譜(HPLC)HPLC分離是基于在樣品在流動相液體和固定相之間的不同分配。一般地說HPLC大體分為以下幾種(未考慮其重要性順序)1.手性液相色譜分離光學(xué)異構(gòu)體可在手性固定相上，用衍生化試劑或在非手性固定相上用流動相添加劑形成非對對映體來實(shí)現(xiàn)。用作雜質(zhì)試驗(yàn)方法時(shí)，如果光學(xué)異構(gòu)體雜質(zhì)在光學(xué)異構(gòu)體藥物之前洗脫,要增加靈敏度。2.離子交換色譜分離基于荷電功能團(tuán)，樣品負(fù)離子(X-)為...
2019 11-21

如何選擇色譜柱

在選擇色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。1.樣品是極性的且弱酸性的；就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱2.如果樣品極性太強(qiáng)，或酸性太強(qiáng)；可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC(親水色譜)，也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對試劑平衡時(shí)間長，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)，另外離子對試劑很難洗下來，基本上用了離子對的色...
2019 11-12

凝膠色譜法的原理

凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù)，是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術(shù)，由于設(shè)備簡單、操作方便，不需要有機(jī)溶劑，對高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。什么是凝膠色譜法凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù)，是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術(shù)，由于設(shè)備簡單、操作方便，不需要有機(jī)溶劑，對高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。凝膠色譜法主要用于高聚物的相對分子質(zhì)量分級分析以及相對分子質(zhì)量分布測試。根據(jù)分離的對象是水溶性的化合...

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