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色譜柱的使用注意內(nèi)容:a.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱(硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度)b.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍c.避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化d.流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中f.氯化物的溶劑對(duì)其有一定的腐蝕性,故使用時(shí)要注意,柱及連接管內(nèi)不能長(zhǎng)時(shí)間存留此類溶劑,以避免腐蝕
反相色譜柱的選擇:1.柱子的PH值使用范圍反相色譜柱優(yōu)點(diǎn)是固定相穩(wěn)定,應(yīng)用廣泛,可使用多種溶劑。但硅膠為基質(zhì)的填料,使用時(shí)一定要注意流動(dòng)相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8,流動(dòng)相的PH值小于2時(shí),會(huì)導(dǎo)致鍵合相的水解;當(dāng)PH值大于7時(shí)硅膠易溶解;經(jīng)常使用緩沖液固定相要降解。一旦發(fā)生上述情況,色譜柱人口處會(huì)塌陷。同樣填料各種不同牌號(hào)的色譜柱不盡相同。2.填料的端基封尾(或稱封口)把填料的殘余硅羥基采用封口技術(shù)進(jìn)行端基封尾,可改善對(duì)極性化合物的吸附或拖尾;含碳量增高了...
如何正確的使用可以延長(zhǎng)液相色譜柱的壽命?1、“保護(hù)柱”的使用保護(hù)柱是很短的色譜柱,填裝和液相色譜柱相同的填料。正確使用”保護(hù)柱”,可以起到阻攔一些容易損壞液相色譜柱的物質(zhì)的作用。從而達(dá)到延長(zhǎng)柱子壽命的效果。相反,如果使用”保護(hù)柱”不當(dāng),可能會(huì)縮短色譜柱的使用壽命。例如,在保護(hù)柱使用過程中,如果污染達(dá)到一定程度而沒有及時(shí)更換,累積的雜物很可能會(huì)沖入色譜柱中,反而會(huì)造成色譜柱損壞。因此,在使用”保護(hù)柱”時(shí),重要的是要知道什幺時(shí)候該換保護(hù)柱。該換的時(shí)候就必須要立即更換。2、選擇高品...
C18液相色譜柱使用注意事項(xiàng)1.看清說明書后再使用色譜柱內(nèi)部保存著什么溶劑一定要看清楚,因此色譜柱的說明書一定要看清楚,當(dāng)然也包括說明書上建議的維護(hù)保養(yǎng)規(guī)定,對(duì)我們都非常的有用。對(duì)于反相柱來說,溶劑基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了,因?yàn)檎嘀丝梢赃m用正相系統(tǒng),也可以適用反相系統(tǒng),因此一定要看清楚,對(duì)于你的方法來說是否需要置換色譜柱內(nèi)部保存溶劑。2.用純水沖洗色譜柱才能把緩沖液沖洗干凈使用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱對(duì)內(nèi)部填料的損傷是大的,尤其是純水,除非你的色譜柱是耐水的。沖洗色...
反相c18色譜柱是在硅膠上或雜化基質(zhì)顆粒上鍵合了C18鍵合相的色譜填料所裝填的色譜柱,按反相色譜條件進(jìn)行操作和分離。反相是液相色譜中常使用的分離模式,而C18柱是常使用的反相色譜柱之一。反相色譜柱的選擇性主要為疏水作用、立體選擇性和氫鍵作用,還有一些二級(jí)作用,比如:離子交換、金屬螯合作用等。我們來分析下反相c18色譜柱的表征參數(shù):1.疏水作用(Hy):通過相同流動(dòng)相體系,在不同的反相色譜柱對(duì)進(jìn)行乙基苯測(cè)試,考察乙基苯的保留因子,保留因子越大,柱的疏水作用越強(qiáng)。2.立體選擇性(...
氣相填充柱的保養(yǎng):氣相填充柱在使用前,可進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在對(duì)氣相填充柱使用前進(jìn)行測(cè)試以后,要根據(jù)不同的情況對(duì)色譜柱進(jìn)行保養(yǎng):①每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng):使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相,實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。②長(zhǎng)期保存氣相填充柱:如氣相填充柱要長(zhǎng)時(shí)間保存,必須存于合適的溶劑下。對(duì)于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中...
寬PH色譜柱提供四種鍵合固定相,用于方法開發(fā)優(yōu)化??稍趯抪H范圍(pH2-9)內(nèi)提供良好的峰形,用一系列色譜柱可靈活開發(fā)其他方法??商峁┒喾N粒徑色譜柱,實(shí)現(xiàn)高速、高分離度、分析和制備分離。色譜峰寬由兩部分構(gòu)成:一、對(duì)稱峰寬。二、拖尾峰寬。所謂對(duì)稱峰寬,就是指這種峰寬不會(huì)造成峰型不對(duì)稱,不會(huì)出現(xiàn)拖尾前伸。而拖尾峰寬,就是指這個(gè)峰寬構(gòu)成,會(huì)導(dǎo)致峰形狀變的不對(duì)稱。我們首先要研究的是對(duì)稱峰寬,這個(gè)導(dǎo)致了峰寬的主要構(gòu)成。對(duì)稱峰寬:對(duì)稱峰寬主要包括兩部分:1、塔板理論正常展寬。2、正常進(jìn)...
凝膠色譜柱的操作要點(diǎn):1、溶脹商品凝膠是干燥的顆粒,通常以40~63um的使用多。凝膠使用前需要在洗脫液中充分溶漲一至數(shù)天,如在沸水浴中將濕凝膠逐漸升溫到近沸,則溶漲時(shí)間可以縮短到1~2小時(shí)。凝膠的溶漲一定要*,否則會(huì)導(dǎo)致色譜柱的不均勻。熱溶漲法還可以殺死凝膠中產(chǎn)生的細(xì)菌、脫掉凝膠中的氣泡。2、裝柱由于凝膠的分離是靠篩分作用,所以凝膠的填充要求很高,必須要使整個(gè)填充柱非常均勻,否則必須重填。凝膠在裝柱前,可用水浮選法去除凝膠中的單體、粉末及雜質(zhì),并可用真空泵抽氣排出凝膠中的氣...
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